《天下第一》以明朝为背景，展现了一段江湖与朝廷交织的传奇故事。护龙山庄的四大密探——天字第一号段天涯、地字第一号归海一刀、玄字第一号上官海棠和黄字第一号成是非，各怀绝技，为了正义和国家奔走。段天涯前往东瀛，结识柳生雪姬，两人相爱却因家族和使命历经波折。归海一刀性格孤傲，在与邪恶势力的对抗中逐渐成长，对上官海棠暗生情愫。成是非原本是街头混混，意外习得绝学，与云罗郡主上演了一段欢喜冤家的爱情。而他们共同的敌人是野心勃勃的曹正淳和后来的铁胆神侯。曹正淳妄图把持朝政，铁胆神侯则为了实现自己的帝王梦不择手段。四大密探在一次次危机中，坚守正义，最终粉碎了铁胆神侯的阴谋，守护了天下太平。