影片围绕水管工马力欧和路易吉两兄弟展开。他们生活在布鲁克林，经营着一家管道维修店，却总是面临各种挫折。一次维修任务中，他们意外被传送进奇幻的蘑菇王国。马力欧在蘑菇王国结识了碧琪公主，得知库巴正妄图统治各个世界。为了阻止库巴的阴谋，马力欧踏上了冒险之旅。他在旅途中不断成长，学会了各种技能，如踩扁敌人、发射火球等。路易吉则不幸被库巴抓走，关在黑暗lands。马力欧在碧琪公主和奇诺比奥的帮助下，一路披荆斩棘，最终成功营救路易吉，并打败了库巴，拯救了蘑菇王国和其他世界。