《蜜蜂总动员》的主角是一只名叫巴里的蜜蜂，它刚从蜂校毕业，本要像其他蜜蜂一样从事单一的工作，比如采蜜。但一次偶然的外出，让他接触到了人类世界。巴里结识了人类女孩凡妮莎，还发现人类一直在利用蜜蜂的蜂蜜。巴里决定为蜜蜂们讨回公道，他将人类告上法庭，要求停止对蜂蜜的使用。法庭上，巴里据理力争，最终赢得了官司，人类也停止了使用蜂蜜。然而，这却引发了一系列意想不到的后果，植物因没有蜜蜂授粉而无法生长，世界陷入危机。巴里和伙伴们不得不再次行动，拯救这个岌岌可危的世界。