拉里是一个生活陷入困境的中年男子，为了维持生计，他应聘到自然历史博物馆当夜间警卫。原本以为这份工作轻松简单，却没想到在夜幕降临后，博物馆里发生了匪夷所思的事情。馆内的展品们都活了过来，有野蛮的匈奴人、可爱的迷你牛仔、暴躁的霸王龙骨架等。拉里一开始被吓得惊慌失措，但他很快意识到必须想办法应对这混乱的局面。在与这些“活展品”的相处过程中，他结识了罗斯福总统的蜡像，在其帮助下逐渐学会和大家相处。他还和猴子、牛仔等人建立了友谊，一起经历了许多冒险。最终，拉里不仅解决了博物馆的神秘危机，还收获了自信和新的人生方向。